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你未必知道的15條ELISA實驗秘訣
瀏覽次數:30發布日期:2020-11-23

只有不斷學習與實驗才能逐漸積累經驗,做出更好的實驗效果。在前面的資xun內容及技術文章中,上海恒遠為大家分享許多ELISA試劑盒的操作技巧、要求、方法等相關技術,我公司技術員根據自身多年【ELISA試劑盒實驗】經驗,整理出的ELISA操作技巧。下面我們一起來看下具體內容,你未必知道的32條ELISA實驗秘訣:

    1.加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

    2.顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

    3.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

    4.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

    5.液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。

    6.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

    7.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

    8.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

    9.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

    10.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

    11.作時必須戴手套,穿工作衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度。

    12.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。

    13.ELISA試劑盒樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。

    14.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

    15.不同批號試劑組分不得混用。

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